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土壤提取試劑的原理與操作方法看完本篇就明白了
釋出時間✘•╃:2021-09-15   點選次數✘•╃:545次
  土壤的成分包括礦物質···、粘土等無機物···、植物及植物的殘骸···、腐殖物質等土壤有機物以及在土壤中存在的微生物▩☁◕。
 
  從土壤中提取的DNA·╃,是微生物···、動植物殘骸等的總DNA·╃,同時·╃,腐殖物質的性質與DNA很相似·╃,DNA提取過程中會將腐殖等物質一起純化·╃,採用傳統的DNA提取方法來除去腐殖物質等抑制因子是十分困難的▩☁◕。
 
  而這些腐殖物質會抑制聚合酶鏈式反應(PCR)及限制性酶切等▩☁◕。因而·╃,從土壤中提取DNA·╃,腐殖物質等抑制因子的除去幹淨是重中之重▩☁◕。
 
  下面讓我們來了解一下土壤提取試劑的原理與操作方法吧
 
  土壤樣品加入懸浮緩衝液Buffer C1·╃,並加入玻璃珠與腐殖酸吸附劑Buffer C2·╃,渦旋使土壤充分重懸·╃,腐殖物質充分釋放·╃,讓吸附劑有效吸附腐殖酸▩☁◕。
 
  再加入高效的裂解液Buffer C3並渦旋在玻璃珠的摩擦作用下·╃,裂解土壤中的所有生物包括G+細菌···、酵母菌···、真菌···、藻類···、線蟲甚至真細菌的孢子···、芽孢···、動植物殘骸等·╃,遊離DNA▩☁◕。
 
  之後·╃,再加入沉澱劑Buffer C4·╃,離心沉澱除去土壤殘渣···、吸附有腐殖酸的吸附劑···、多糖多酚···、絕大部分的色素等·╃,獲得清亮的···、含有DNA的上清·╃,上清加入異丙醇沉澱獲得DNA粗品▩☁◕。
 
  粗品中加入ddH2O溶解後·╃,再加入Buffer C5離心進一步除去腐殖酸等雜質·╃,獲得上清·╃,往上清加入乙醇後轉移到矽膠純化柱中過柱吸附DNA·╃,除去雜質▩☁◕。
 
  再加入漂洗液Buffer WB離心進一步除去蛋白質···、腐殖酸等雜質·╃,加入漂洗液DNA Wash Buffer除去鹽分等▩☁◕。乾燥柱子後加入滅菌去離子水後·╃,離心獲得高純的DNA▩☁◕。
 
  以上內容便是本次為大家分享關於土壤提取試劑的相關資訊·╃,希望大家在看完之後能夠對該產品有更多的瞭解▩☁◕。

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